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透射式电子显微镜

作者:蒲柘光电 日期:2023-07-12 浏览:161

透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)的组件包括:
 
1. 电子枪:发射电子,由阴极、栅极、阳极组成。
2. 聚光透镜:即电子透镜,将电子束聚集,可用于控制照明强度和孔径角。
3. 样品室:放置待观察的样品,并装有旋转台,用以改变试样的角度,还有装配加热、冷却等设备。
4. 物镜:为放大率很高的短距透镜,作用是放大电子像。物镜是决定透射电子显微镜分辨能力和成像质量的关键。
5. 中间镜:为可变倍的弱透镜,作用是对电子像进行二次放大。通过调节中间镜的电流,可选择物体的像或电子衍射图来进行放大。
6. 透射镜:为高倍的强透镜,用将二次放大后的中间像进一步放大后在荧光屏上成像。
7. 二级真空泵:对样品室抽真空。
8.照相装置:用以记录影像。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量,必须制备更薄的超薄切片,通常为 50~100 nm。
 
所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。通常用薄切片法或冷冻蚀刻法制备:
 
(1)薄切片法
 
通常以锇酸和戊二醛固定样品,以环氧树脂包埋,以热膨胀或螺旋推进的方式推进样品切片,切片厚度 20~50 nm,采用重金属盐染色,以增大反差。
 
(2)冷冻蚀刻法 亦称冰冻断裂法
 
将标本置于-100°C 的干冰或-196°C 的液氮中冰冻后,以冷刀急速断开标本。断裂的标本升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出断面结构,称为蚀刻。蚀刻完成后,向断面以45o 角喷涂一层蒸气铂,再以90o 角喷涂一层碳,加强反差和强度。然后用次氯酸钠溶液消化样品,剥下碳和铂的膜,称为复膜,能显示标本蚀刻面的形态。在电镜下观察得到的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。
 
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